二氧化碳培養箱操作使用及日常保養

二氧化碳培養箱為細胞生長提供了理想的生長環境，細胞在培養箱中培養數月甚數年，如果培養不當導致細胞死亡可能造成極大的科研成果損失。培養箱本身性能的穩定和可靠性固然重要，另外，正確的使用方法和日常保養對實驗結果也是關重要。

今天天美為大家介紹減少實驗室細胞污染的三種途徑：

1.正確的使用培訓；

2.持續的日常保養；

3.適當的擺放位置。

1.正確的使用培訓。

       實驗室內往往眾多實驗人員共用一臺培養箱，難免有人為操作失誤，但會增大交叉污染的風險，因此應對所有實驗人員進行培養箱的使用培訓。

需要注意以下幾點：

設備使用培訓

       使用培養箱前必須著個人防護裝備，按照實驗室生物安全等級要求實施實驗室管理規范、無菌操作方法、標準操作流程（SOP）。

       如實驗服袖口需扎進手套內，未扎進的袖口可能接觸到潔凈的培養基，會增加交叉污染的風險，另外裸露皮膚上的可能潛在的污染源也會增加交叉污染的風險

       手套使用前用70%常用消毒劑消毒；

       培養瓶、培養盤、培養皿等在放入培養箱前需做好標記；

       從箱子后部依次往前擺放培養基，以免早放置的被過多干擾。近期需要取出的材料放靠近箱門處并做好標記；

       帶蓋的長頸瓶應遠離箱門以避免交叉污染；

       避免堆疊太多培養基；

       為避免干擾盡量少開箱門。

人員操作培訓

       建立完善的實驗室管理規范：

       新進實驗員應建立培訓流程；

       實驗室內應定期或不間斷進行操作培訓；

       做好詳盡的文件記錄，文件記錄不僅單純的記錄實驗室事件，對設備定期維護、實驗數據查找都能起到很好的提示和記錄，比如提示每周檢查過濾器、開門頻率對細

胞生長的影響。

2.持續的日常維護保養

       培養箱日常維護保養對其性能的保障非常重要，甚比操作技術失誤對實驗結果的影響更大。做好培養箱的日常維護不僅減少對實驗結果的影響更能延長培養箱的使用壽命，降低實驗室成本。

完善的文件管理

       廠商提供的操作維護說明書是很好的參考文件，會列舉日常使用及保養需注意的要點，可以作為實驗室培養箱維護文件的參考。制定維護保養文件時需全面考慮培養箱使用頻率、實驗室環境潔凈度、使用人員的數量、以及培養細胞的類型等，綜合各方面情況列出合理的方案。

箱體的定期清潔

       培養箱內外部的定期清潔頻率取決于培養細胞的類型和實驗室環境。

       外部清潔必須定期去除灰塵及長期附著在表面的污染物，這些污染物在開門時很可能隨空氣流動潛入箱體內。培養量大的實驗室建議每周清潔一次，培養量小的實驗室建議每月清潔一次。使用較溫和的家用清潔劑或蒸餾水清潔即可。

       不銹鋼內膽建議每月清潔一到兩次，圓角的設計（圖D）可以減少污染物的產生，可使用70%異丙醇、酒精或其它無腐蝕性的消毒劑擦拭，切記不可使用鹵素類消毒劑（次氯酸、漂白 粉）。門口墊圈處（圖E）很易滋生污染物，需注意加強清潔，或拆下進行高溫滅菌。

水盤的清潔

       水盤的清潔和換水是培養箱日常維護很重要的項目，少一周需清潔一次，頻繁加水以保障飽和濕度。水盤加水使用蒸餾水或去離子水，可以加少劑量的硫酸銅溶液

抑制污染物。

防止干燥

       如果培養環境濕度不足，培養基中的水分會蒸發造成環境干燥影響細胞生長。少每周加一次水對保持培養箱濕度非常重要。

污染風險降到 低

       細菌、霉菌、病毒或支原體污染是細胞生長大的威脅。現代的培養箱的設計和特點可以適當減少污染發生。

HEPA過濾器

       閉環HEPA過濾器是減少污染發生的一個重要設計。HEPA過濾器持續提供箱內潔凈的空氣。但為保證HEPA過濾的有效性，HEPA需要定期更換，每周或每兩周應定期檢查過濾器。進氣過濾器（圖F）的壽命一般在3-6個月。NuAire建議供氣過濾器（圖G）每使用5瓶氣或已變黃時更換一次，大的囊性過濾器（圖H）每兩年需更換一次。

       配備HEPA過濾器的培養箱類似一個微型潔凈間，箱內持續過濾的空氣使箱體空氣潔凈度達到百級。每一次開箱門都可能造成污染物的侵襲，NuAire培養箱每20分鐘換氣一次，使污染物快速被過濾，箱體內空氣潔凈度達ISO 5級。

循環滅菌

       一些實驗室潛在病原微生物如HIV病毒，需要145℃干熱循環滅菌才能有效滅殺。145℃滅菌程序需要持續8-14小時，可選擇在夜間運行。NuAire培養箱*的層架和內部五金件耐受145℃滅菌，無需滅菌前取出，節約了滅菌時間。

      145℃滅菌需要按照實驗室SOP根據實際需要運行，并且不能代替日常的清潔保養。

3.放置適當位置

       培養箱需要放置在實驗室內合適的位置：遠離走廊，環境溫度需穩定，遠離水源，遠離通氣設備以免空氣污染，遠離窗口避免陽光直射，遠離其它熱源如高壓蒸汽滅菌器，以及離電源近的位置。